一个插科打诨的小偷和一群不太走运的冒险者共同参与了一场惊天盗窃计划，他们要找回遗失已久的圣物。但当他们招惹了不该惹的人，事情开始向着危险且错误的方向发展下去。

影片讲述了新生代蜘蛛侠迈尔斯（沙梅克·摩尔ShameikMoore配音）携手蜘蛛格温（海莉·斯坦菲尔德HaileeSteinfeld配音），穿越多元宇宙踏上更宏大的冒险征程的故事。面临每个蜘蛛侠都会失去至亲的宿命，迈尔斯誓言打破命运魔咒，找到属于自己的英雄之路。而这个决定和蜘蛛侠2099（奥斯卡·伊萨克OscarIsaac配音）所领军的蜘蛛联盟产生了极大冲突，一场以一敌百的蜘蛛侠大内战即将拉响！